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四氯化碳肝臟纖維化小鼠模型氯膦酸鹽脂質體清除巨噬細胞實驗方案

更新時間:2024-05-31   點擊次數:434次

肝纖維化是一種慢性肝病在修復過程中的病理狀態,其中慢性肝病包括慢性病毒性肝炎、酒精性肝病、非酒精性脂肪性肝炎、膽汁淤積性肝炎以及某些代謝性疾病等。研究表明,肝纖維化作為所有慢性肝病的共同病理階段,是肝硬化甚至肝癌發展的必經階段。大量研究證明,適當的治療措施可逆轉肝纖維化和早期肝硬化病理狀態,控制肝纖維化的發展對于肝硬化甚至肝癌的防治具有至關重要的作用。因此,逆轉肝纖維化的治療成為眾多慢性肝臟疾病治療的匯聚點。

慢性肝損傷暴露于纖維化,其終末期肝硬化與危及生命的并發癥有關。盡管肝硬化長期以來一直被認為是不可逆的,但來自慢性肝病患者和小鼠模型的數據已經明確表明,在消除根本原因后,纖維化甚至可以在后期恢復。然而,在許多情況下,這一目標無法實現,這凸顯了對阻止進展和/或促進已建立的纖維化/肝硬化的消退的治療的迫切未滿足需求。去除或消除病原體可促進炎癥和促纖維化反應的抑制,以及纖維化細胞的失活和/或消失,導致肝纖維化的消退。在免疫細胞中,肝巨噬細胞的不同亞群在控制纖維化進展和消退中起著雙重作用。特別是,來自人類樣本和實驗小鼠模型的數據表明,在肝損傷期間,具有高表達 Ly6C 的募集單核細胞衍生巨噬細胞 (MoMac) 分泌促炎和促纖維化細胞因子,從而延續纖維化反應。相比之下,小鼠模型研究表明,在纖維化消退期間,具有 Ly6Clo 表型的恢復性 MoMac 群體會促進疤痕退化。因此,控制促纖維化與恢復性巨噬細胞平衡被認為是促進纖維化消退的有吸引力的策略。

四氯化碳法誘導肝纖維化模型的原理屬于氧化應激反應,機制是四氯化碳在肝臟內代謝生成三氯甲基自由基,產生的自由基誘發脂質過氧化反應,生成的過氧化物包括丙二醛和4-羥基壬烯酸,它們以線粒體為靶點,破壞線粒體膜結構,從而損傷肝細胞膜,激活肝星狀細胞(hepaticstellatecell,HSC)釋放Ⅰ型膠原酶和Ⅳ型膠原酶,促進HSC增生,導致肝纖維化。

四氯化碳肝臟纖維化小鼠模型氯膦酸鹽脂質體清除巨噬細胞實驗方案

對于慢性模型,持續時間比較長,如何在合適的時間點使用荷蘭Liposoma的巨噬細胞清除劑Clodronateliposomes氯膦酸鹽脂質體清除單核巨噬細胞就顯得很關鍵,相對于試劑成本,慢性模型的時間成本更可貴。如何參考相關的文獻,就很迫切。Nature Communications的MAIT cell inhibition promotes liver fibrosis regression via macrophage phenotype reprogramming的文獻值得參考。

首先,作者做出來單核巨噬細胞在模型里面的動態曲線。

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其次,以四氯化碳模型為基礎,聯合研究的目的分子,設計合適的注射Clodronateliposomes的timeline。

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最后,為了增加實驗結果的公信力,作者使用了荷蘭Liposoma的巨噬細胞清除試劑(貨號CP-005-005)。靜脈注射,劑量10ul/g體重。

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荷蘭Liposoma的Clodronateliposomes氯膦酸鹽脂質體巨噬細胞清除試劑(貨號CP-005-005)產品圖片。

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